产品货号：
JN0080
中文名称：
Taq DNA连接酶
英文名称：
Taq DNA Ligase
产品规格：
1kU|2kU|40kU
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本酶是从Thermus aquaticus HB8中克隆出的DNA连接酶，利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Taq DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成，使杂交到同一互补靶DNA链上的两条契合寡核苷酸链的5'-磷酸末端和3'-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此，可以用它来检测单碱基替换。在45℃～65℃范围内，Taq DNA连接酶均有活性。
- 通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行突变；
- 用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测；
- 检测单碱基替换。
- 本Taq DNA连接酶具有较好的耐热性。
- 宽广温度范围内均有活性。
50μL反应体系中，45℃反应条件下，15分钟能使50%的12bp粘性末端片段发生连接所需要的酶量。
注：12bp粘性末端来自于BstEII消化1μg λDNA。
| 组分 | 1kU | 2kU | 40kU |
| Taq DNA Ligase(40U/μL) | 25μL | 50μL | 1mL |
| 10×Taq Ligase Buffer | 500μL | 1mL | 10mL×2 |
保存：连接酶置于-20℃，缓冲液置于-70℃。
1×Taq Ligase Buffer：
20mM Tris-HCl(pH7.6@25℃)，25mM KAc，10mM MgAc2，10mM DTT，1mM NAD和0.1% Triton X-100。
1×Taq Ligase Buffer，45℃温育。
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，严格质量控制，确保该产品具有最高的活性和纯度。
- 本酶需NAD+作辅因子，10×Taq Ligase Buffer中已含NAD+，缓冲液应于-70℃贮存，以延长NAD+的半衰期。
- Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase。
- 常用反应体系（50μL）
成分 用量 DNA ≤1μg 10×Taq Ligase Buffer 5μL Taq DNA Ligase(40U/μL) 2μL ddH2O 至50μL - 反应条件：45℃温育15min。
- 加入终止染液（50%甘油，50mM EDTA和溴酚兰）终止反应。
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